Антиоксидантное действие дигидрокверцетина при острой гипоксической гипоксии. При изучении эффектов дигидрокверцетина на свободнорадикальные процессы в разных тканях организма был получен следующие результаты. В условиях предварительного введения дигидрокверцетина перед гипоксической гипоксией в мозге происходило значимое накопление диеновых коньюгатов (26%; р<0,05), ТБК-реактивных продуктов (37%; р<0,05) и оснований Шиффа (20%; р<0,05) относительно контрольной группы крыс. При этом значимых отличий в накоплении продуктов переокисления липидов по сравнению со второй группой животных (Гипоксия) не отмечали. Кроме того, при введении дигидрокверцетина перед гипоксической гипоксией в мозге происходило снижение активности глутатионпероксидазы на 26% (р<0,05), глутатионредуктазы – на 24% (р<0,05) и содержания SH-групп на 18% (р<0,05) относительно интактных животных. В то же время активность супероксиддисмутазы, каталазы и пероксидазы возрастала, соответственно, на 32% (р<0,05), 47% (р<0,05) и 36% (р<0,05) по сравнению с контролем. На фоне введения дигидрокверцетина в мозге животных 5-й группы выявлено снижение уровня диеновых коньюгатов (на 14%; р<0,05) и оснований Шиффа (на 18%; р<0,05) одновременно с возрастанием активности СОД (на 35%; р<0,05), каталазы (на 23%; р<0,05), пероксидазы (на 32%; р<0,05), ГПО (на 29%; р<0,05), ГР (на 30%; р<0,05) и содержания SH-групп (на 15%; р<0,05).

В печени крыс, подвергнутых введению дигидрокверцетина перед гипоксической гипоксией, обнаружено накопление диеновых коньюгатов, ТБК-реактивных продуктов и конечных продуктов (ШО) относительно контрольной группы. В 5-й группе животных также установлено повышение активности СОД (на 27%; р<0,05) и снижение активности пероксидазы (на 23%; р<0,05), ГПО (на 33%; р<0,05), ГР (на 32%; р<0,05) и уровня SH-групп (на 17%; р<0,05) по сравнению с 1-й группой крыс. По сравнению с животными, подвергнутыми гипоксической гипоксии (2-я группа), в печени крыс 6-й группы установлено снижение уровня оснований Шиффа на 16% (р<0,05). На этом фоне у крыс 6-й группы установлена повышенная активность СОД (96%; р<0,05), каталазы (44%; р<0,05), ГР (20%; р<0,05) и уровень SH-групп (26%; р<0,05) относительно животных 2-й группы. При введении дигидрокверцетина (5 группа) в печени крыс отмечено снижение содержания оснований Шиффа (на 22%; р<0,05) и одновременное повышение антиоксидантного статуса за счет возрастания активности СОД (на 23%; р<0,05), пероксидазы (на 19%; р<0,05), ГПО (на 16%; р<0,05), ГР (на 14%; р<0,05) и содержания SH-групп (на 17%; р<0,05) по сравнению с контролем.

Следовательно, введение дигидрокверцетина способствует изменению интенсивности свободнорадикальных процессов в печени путем активации антиоксидантного звена регуляции и снижения накопления продуктов ПОЛ даже в большей степени, чем в мозге.

В сердце животных 6-й группы также происходило накопление диеновых коньюгатов (22%; р<0,05), ТБК-реактивных продуктов (26%; р<0,05) и оснований Шиффа (14%; р<0,05) по сравнению с контролем. Тем не менее, относительно 2-й группы крыс у животных, подвергнутых предварительному введению дигидрокверцетина перед гипоксической гипоксией, установлено снижение содержания ДК (на 13%; р<0,05), ТБК-реактивных продуктов (на 36%; р<0,05) и ШО (на 18%; р<0,05). Эти изменения в накоплении продуктов ПОЛ можно объяснить тем, что дигидрокверцетин способствовал активации системы антиоксидантной защиты. Таблица 1

Содержание диеновых коньюгатов (ДК), ТБК-реактивных продуктов (ТБК-РП) и активность супероксиддисмутазы (СОД), каталазы и пероксидазы в мозге, печени, сердце и крови крыс при введении кверцетина перед острой гипоксией, (М ± m)

Ткани	Серии	ДК нмоль/мг липидов	МДА нмоль/г, мл	ШО ед./мг липида	СОД ед.акт./г, мл	Каталаза ед.пл./г, мл
Мозг	Контроль	0,42±0,03	28,4±2,4	2,44 ± 0,22	546±44	1,36±0,2
	Гипоксия	0,54±0,01*	40,2±3,6*	3,12 ± 0,30	371±21*	0,8±0,05*
	Контроль+кверцетин	0,31±0,09*	22,3±2,1*	1,7 ± 0,44*	682±38*	1,52±0,4
	Гипоксия+кверцетин	0,51±0,03*	36,5±2,77*	2,88 ± 0,21	482±44*	0,84±0,04*
Печень	Контроль	0,50±0,01	40,9±3,7	2,58 ± 0,18	4780±260	5,9±0,3
	Гипоксия	0,69±0,01*	54,8±6,5*	3,5 ± 0,23*	3107±166*	4,29±0,1*
	Контроль+кверцетин	0,43±0,02	30,8±2,6*	2,11 ± 0,15*	5650±344*	6,9±0,6*
	Гипоксия+кверцетин	0,61±0,04*	50,4±5,0*	3,0 ± 0,14	4207±311	4,67±0,2*
Сердце	Контроль	0,44±0,03	30,6±1,5	2,72 ± 0,22	447±36	1,6±0,2
	Гипоксия	0,62±0,04*	60,1±5,6*	3,8 ± 0,20*	287±21*	0,89±0,04*
	Контроль+кверцетин	0,36±0,02*	26,8±3,2	2,14 ± 0,20*	567±28*	1,9±0,1
	Гипоксия+кверцетин	0,51±0,04	48,7±4,0*	3,26 ± 0,12	358±22*	1,04±0,06*
кровь	Контроль	4,35±0,21	150,9±10,1	7,42 ± 0,45	1400±66	4,08±0,1
	Гипоксия	5,65±0,22*	196,5±9,5*	9,86 ± 0,81*	1148±22*	3,22±0,12*
	Контроль+кверцетин	3,75±0,14*	127,7±4,4*	6,5 ± 0,44*	1610±72*	4,8±0,36*
	Гипоксия+кверцетин	4,97±0,11	176,8±8,7	8,6 ± 0,79*	1294±63*	3,44±0,2*

* - достоверные различия относительно контроля
Таблица 2

Содержание оснований Шиффа, небелковых SH-групп и активность глутатионпероксидазы (ГПО) и глутатионредуктазы (ГР) в мозге, печени, сердце и крови крыс при введении кверцетина перед острой гипоксией, (М ± m)

Ткани	Серии	Пероксидаза ед.пл./г, мл	ГПО мкмольНАДРН/ мг белка/мин	ГР мкмольНАДРН/ мг белка/мин	Небелковые SH-группы мкмоль/г ткани
Мозг	Контроль	42,85±3,2	0,0107 ± 0,0071	0,033 ± 0,003	6,5 ± 1,4
	Гипоксия	29,28±2,1*	0,0077 ± 0,003*	0,023 ± 0,002*	4,4 ± 0,7*
	Контроль+кверцетин	50,56±2,2	0,0124 ± 0,005	0,040 ± 0,001*	7,4 ± 0,9*
	Гипоксия+кверцетин	31,8±4,5*	0,0088 ± 0,005*	0,028 ± 0,005*	5,2 ± 1,3*
Печень	Контроль	104,28±8,14	0,06 ± 0,01	0,044 ± 0,006	6,4 ± 0,4
	Гипоксия	82,5±6,3*	0,04 ± 0,01*	0,025 ± 0,004*	4,2 ± 0,4*
	Контроль+кверцетин	121,53±6,2*	0,07 ± 0,02	0,055 ± 0,001*	7,4 ± 0,7*
	Гипоксия+кверцетин	87,9±5,1	0,05 ± 0,01	0,037 ± 0,002*	4,8 ± 0,7*
Сердце	Контроль	34,3±3,6	0,052 ± 0,002	0,028 ± 0,003	5,9 ± 0,6
	Гипоксия	21,0±1,8*	0,038 ± 0,008*	0,016 ± 0,001*	3,8 ± 1,2*
	Контроль+кверцетин	45,6±4,2*	0,069 ± 0,012*	0,035 ± 0,006*	6,9 ± 0,4*
	Гипоксия+кверцетин	26,1±2,1*	0,038 ± 0,009*	0,021 ± 0,005*	4,8 ± 0,2*
кровь	Контроль	148,6±9,5	0,56 ± 0,04	0,24 ± 0,02	8,2 ± 2,2
	Гипоксия	100,35±5,6*	0,41 ± 0,05*	0,18 ± 0,06*	5,7 ± 1,3*
	Контроль+кверцетин	170,5±4,2*	0,64 ± 0,06*	0,27 ± 0,01	9,1 ± 2,0*
	Гипоксия+кверцетин	113,56±6,4	0,43 ± 0,09*	0,21 ± 0,01*	6,7 ± 2,1*

* - достоверные различия относительно контроля
Относительно контроля в 6-й группе животных выявлено увеличение активности СОД (на 25%; р<0,05), каталазы (на 25%; р<0,05), пероксидазы (на 46%; р<0,05). По сравнению со 2-й группой крыс (Гипоксия) активность СОД, каталазы, пероксидазы, глутатионредуктазы и содержание SH-групп было выше, соответственно, на 95% (р<0,05), 125% (р<0,05), 139% (р<0,05), 38% (р<0,05) и 24% (р<0,05). Также необходимо отметить, что активность ферментов глутатионовой системы в сердце животных 6-й группы была ниже контрольного уровня: активность ГПО – на 13%, а глутатионредуктазы – на 21% (р<0,05).

Введение дигидрокверцетина интактным крысам (5-я группа) способствовало снижению уровня диеновых коньюгатов (на 27%; р<0,05), ТБК-реактивных продуктов (на 18%; р<0,05) и, особенно, оснований Шиффа (на 31%; р<0,05) в сердце по сравнению с контрольной группой. Снижение содержания продуктов ПОЛ в сердце крыс 5-й группы сопровождалось возрастанием активности СОД (на 19%; р<0,05), каталазы (на 19%; р<0,05), пероксидазы (на 173%; р<0,01), глутатионпероксидазы (на 15%; р<0,05), глутатионредуктазы (на 18%; р<0,05) и уровня SH-групп (на 15%; р<0,05).

В крови животных 6-й группы (введение дигидрокверцетина перед гипоксической гипоксией) выявлено накопление диеновых коньюгатов (44%; р<0,05), а изменения в содержании ТБК-реактивных продуктов и оснований Шиффа были недостоверными относительно контрольной группы животных. На этом фоне в крови крыс 6-й группы отмечено увеличение активности СОД (на 26%; р<0,05) и каталазы (на 76%; р<0,05), а также снижение активности пероксидазы (на 39%; р<0,05), глутатионпероксидазы (на 39%; р<0,05), глутатионпероксидазы (на 21%; р<0,05) и уровня SH-групп (на 17%; р<0,05) по сравнению с интактными крысами.

Следовательно, несмотря на снижение функциональной активности ферментов глутатионовой системы и пероксидазной активности в целом, за счет увеличения супероксидустраняющей и каталазной активности накопления конечных продуктов ПОЛ в крови крыс, которым вводили дигидрокверцетин перед гипоксической гипоксией, не происходило. При сравнении результатов исследования 2-й и 6-й групп было показано следующее. Снижение накопления оснований Шиффа (на 35%; р<0,05) в крови крыс 6-й группы наблюдали на фоне повышения активности СОД (на 54%; р<0,05), каталазы (на 124%; р<0,01), церулоплазмина (на 18%; р<0,05) и уровня SH-групп (на 19%; р<0,05), но снижения активности глутатионпероксидазы (на 17%; р<0,05).

В крови крыс 5-й группы отмечали снижение накопления ТБК-реактивных продуктов на 17% (р<0,05) и оснований Шиффа – на 35% (р<0,05) одновременно с увеличением активности СОД (30%; р<0,05), каталазы (69%; р<0,05), церулоплазмина (21%; р<0,05), пероксидазы (16%; р<0,05), ГПО (14%; р<0,05), ГР (21%; р<0,05) и уровня SH-групп (16%; р<0,05).

Сравнительный анализ результатов исследования эффектов изученных флавоноидов показал некоторые различия их влияния на свободнорадикальные процессы в разных тканях животных при гипоксической гипоксии. Предварительное введение дигидрокверцетина способствовало более значительному повышению активности супероксиддисмутазы (на 50%; р<0,05), каталазы (на 138%; р<0,01) и пероксидазы (на 84%; р<0,05) относительно группы крыс, которым вводили кверцетин. Введение же интактным крысам ДГК приводило к более выраженному накоплению продуктов ПОЛ: ДК – на 16% (р<0,05), ТБК-РП – на 20% (р<0,05) и ШО – на 17% (р<0,05) относительно животных, которым вводили кверцетин. При этом активность СОД, каталазы, пероксидазы, ГПО и ГР, а также содержание SH-групп не различались в 3-й и 5-й группах крыс. В печени крыс, подвергнутых предварительному введению ДГК перед гипоксической гипоксией, наблюдали более значительное повышение активности СОД (на 44%; р<0,05) и каталазы (на 33%; р<0,05), а также снижение активности ГПО (на 20%%; р<0,05) относительно животных, которым перед гипоксией вводили кверцетин. В то же время, введение дигидрокверцетина интактным животным способствовало достоверному накоплению ТБК-реактивных продуктов (26%; р<0,05) и снижению активности каталазы (на 20%; р<0,05) в печени по сравнению с 3-й группой животных. В сердце в условиях введения ДГК перед гипоксической гипоксией обнаружено понижение уровня ТБК-реактивных продуктов (на 21%; р<0,05) и возрастание активности СОД (на 56%; р<0,05), каталазы (на 92%; р<0,05), пероксидазы (на 92%; р<0,05) и ГПО (на 18%; р<0,05) относительно 4-й группы крыс. У животных, которым вводили ДГК (5 группа), выявлено снижение накопления ШО (на 12%; р<0,05) и возрастание активности пероксидазы (на 26%; р<0,05) по сравнению с 3-й группой крыс (введение кверцетина).

В крови животных, которым вводили дигидрокверцетин перед гипоксической гипоксией, выявлено более значительное накопление ДК (26%; р<0,05) и повышенная активность супероксиддисмутазы (36%; р<0,05), каталазы (109%; р<0,01) на фоне снижения активности пероксидазы (20%; р<0,05) и ГПО (21%; р<0,05) относительно крыс 4-й группы. В крови крыс, которым вводили дигидрокверцетин (5-я группа) установлено повышение содержания ДК (на 25%; р<0,05) и активности каталазы (на 43%; р<0,05) по сравнению с 3-й группой животных.

Таким образом, в ответ на введение дигидрокверцетина в тканях организма отмечается более значительное накопление продуктов перекисного окисления липидов, но на этом фоне выявляется и более выраженное возрастание активности антиоксидантных ферментов по сравнению с животными, которым вводили кверцетин. Данный эффект дигидрокверцетина можно охарактеризовать как эффект фармакологического прекондиционирования, т.е., когда в ответ на введение препарата повышается интенсивность метаболических процессов, что способствует подготовке организма к внешнему (стрессорному) воздействию. Тогда как, в условиях введения дигидрокверцетина перед гипоксической гипоксией более значительное накопление продуктов ПОЛ выявлено только в крови (ДК), тогда как в сердце, напротив, установлено снижение уровня ТБК-реактивных продуктов относительно животных 4-й группы. Также при сравнении результатов изучения состояния антиоксидантной системы защиты в условиях введения флавоноидов были выявлены более выраженные эффекты дигидрокверцетина на активность СОД и каталазы во всех исследованных тканях. В печени и крови более низкие значения активности ГПО выявлены в 6-й группе по сравнению с 4-й. В мозге и сердце животных 6-й группы активность пероксидазы была выше уровня крыс 4-й группы. Следовательно, действия флавоноидов в условиях гипоксической гипоксии можно охарактеризовать как тканеспецифичные.